2024 लेखक: Elizabeth Oswald | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2024-01-13 00:07
आप अपने नमूने को अल्ट्राफिल्ट्रेशन द्वारा पिछले वॉल्यूम के 1 दसवें हिस्से तक डिसेल्ट भी कर सकते हैं, जो फिर से पतला होता है और यूएफ चरण दोहराता है। अलवणीकरण के लिए सबसे अच्छा तरीका है 50 मिमी बफर के खिलाफ जेल निस्पंदन द्वारा विलवणीकरण, अल्ट्राफिल्ट्रेशन (शास्त्रीय, केन्द्रापसारक नहीं) की तुलना में।
प्रोटीन शुद्धिकरण में विलवणीकरण क्या है?
डिसाल्टिंग का उपयोग प्रोटीन के घोल से लवण निकालने के लिए किया जाता है, न्यूक्लिक एसिड से फिनोल या अनिगमित न्यूक्लियोटाइड्स या संयुग्मित प्रोटीन से अतिरिक्त क्रॉसलिंकिंग या लेबलिंग अभिकर्मकों।
आप प्रोटीन को कैसे शुद्ध करते हैं?
बल्क प्रोटीन शुद्धिकरण में, प्रोटीन को अलग करने का एक सामान्य पहला कदम है वर्षा अमोनियम सल्फेट के साथ (NH4) 2एसओ4। यह अमोनियम सल्फेट की बढ़ती मात्रा को जोड़कर और अवक्षेपित प्रोटीन के विभिन्न अंशों को एकत्रित करके किया जाता है। इसके बाद, डायलिसिस का उपयोग करके अमोनियम सल्फेट को हटाया जा सकता है।
आप बफर एक्सचेंज प्रोटीन कैसे करते हैं?
बफर एक्सचेंज, हालांकि, फर्स्ट इक्विलिब्रेटिंग द्वारा किया जाता है बफर के साथ कॉलम रेजिन के साथ नमूना समाप्त होना चाहिए। दोनों ही मामलों में, बफर घटक नमूना को अंदर ले जाते हैं कॉलम को उस समाधान से बदल दिया जाएगा जिसके साथ कॉलम पूर्व-संतुलित है।
प्रोटीन के विलवणीकरण के लिए निम्नलिखित में से कौन सी क्रोमैटोग्राफी तकनीक लागू की जा सकती है?
जैसा कि ऊपर बताया गया है, जेल फिल्ट्रेशन प्रोटीन के लिए प्रभावी रूप से उपयोग किया जा सकता हैपानी के साथ जेल निस्पंदन कॉलम को पहले संतुलित करके विलवणीकरण और पूरा किया जाता है। हालांकि, बफर एक्सचेंज को पहले लक्ष्य बफर के साथ कॉलम रेजिन को संतुलित करके पूरा किया जाता है।
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