2024 लेखक: Elizabeth Oswald | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2024-01-13 00:07
ट्रिप्सिनाइजेशन ट्रिप्सिन का उपयोग करके कोशिका पृथक्करण की प्रक्रिया है, एक प्रोटीयोलाइटिक एंजाइम जो प्रोटीन को तोड़ता है, उस पोत से आसन्न कोशिकाओं को अलग करने के लिए जिसमें उन्हें सुसंस्कृत किया जा रहा है। जब एक सेल कल्चर में जोड़ा जाता है, तो ट्रिप्सिन प्रोटीन को तोड़ देता है जो कोशिकाओं को बर्तन का पालन करने में सक्षम बनाता है।
हम कोशिकाओं को ट्रिप्सिनाइज क्यों करते हैं?
ट्रिप्सिनाइजेशन अक्सर कोशिकाओं को एक नए कंटेनर में जाने की अनुमति देने के लिए किया जाता है, प्रयोग के लिए अवलोकन, या फ्लास्क में संगम की डिग्री में कमी के प्रतिशत को हटाकर कोशिकाओं।
ट्रिप्सिन कोशिकाओं को अलग करने के लिए कैसे काम करता है?
ट्रिप्सिन/ईडीटीए कोशिकाओं को अलग करने की एक संयुक्त विधि है। ट्रिप्सिन सी-टर्मिनल पर विशेष रूप से लाइसिन या एगिनिन पर आसंजन प्रोटीन के अमीनो एसिड को काटकर सेल-सेल और सेल-मैट्रिक्स इंटरैक्शन में आसंजन प्रोटीन को काटता है यदि अपस्ट्रीम एमिनो एसिड प्रोलाइन नहीं है।
आप trypsinized अनुयाई कोशिकाओं को कैसे प्राप्त करते हैं?
प्रक्रिया
- संस्कृति के बर्तन से माध्यम को आकांक्षा द्वारा हटा दें और मोनोलेयर को Ca2+ और Mg से मुक्त नमक के घोल से धो लें। 2+ सीरम के सभी निशान हटाने के लिए। …
- कोशिकाओं के मोनोलेयर को पूरी तरह से ढकने और ~2 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस इन्क्यूबेटर में रखने के लिए कल्चर वेसल में पर्याप्त ट्रिप्सिन या ट्रिप्सिन/ईडीटीए घोल डालें।
मैं सेल कल्चर में ट्रिप्सिन को कैसे निष्क्रिय कर सकता हूं?
सेल अलग दिखने के बाद 2 वॉल्यूम जोड़ें ट्रिप्सिन को निष्क्रिय करने के लिए पूर्व-गर्म पूर्ण विकास मीडिया का। >95% कोशिकाओं की वसूली सुनिश्चित करने के लिए कई बार सेल परत की सतह पर पिपेटिंग करके माध्यम को धीरे से फैलाएं। सीरम मुक्त संस्कृतियों के लिए, सोयाबीन ट्रिप्सिन अवरोधक (उत्पाद संख्या
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